白天因为酵母意外的过期或者是因为自己太糊涂，根本没想起来这东西还有保质期的问题。结果，白天还得跑一趟西站买酵母。不过祸福可能总是相伴的，第一次做天津的地铁，还挺好玩～自从修好就没什么机会坐，终于做了一次，虽然晕晕乎乎坐的～^^

今天再一次证明射手座方向感还是挺好的。虽然老爸和我说“往西走”晕死，我根本不知道东南西北，凭感觉瞎走，竟然走到卖的地方。（PS：不过可能因为老爸描述清楚，老爸说：“脸冲着太阳，然后转向右走～"^^）

白天加96孔板，看得我眼都花了，才发现加班也是个技术活，不大好干，这个很影响结果，希望这个我可以过关。

脑袋乱乱，实验还没计划好，就要开始做，总怕自己忘了什么。文章，感觉自己需要闭关修炼～^^

写篇文章，给自己打打气～有时，真的不知道一个message带来的是好还是坏。

今天试剂公司给我换了试剂，孵育了一小会，瞬间出现云雾状分层。妈妈呀，TX-114这样的化学试剂也能存在问题，真是不能理解？两个试剂的区别就是一个是MH分装的，一个是Amersco分装的。唉。。。年前白斗争了半天，年后，新的一年的开始，找到了原因，这个算是好兆头，还是不好呢～又要面对无尽的体力劳动^^，继续减肥ing~不过，如果顺顺利利做完，可以得到很多好处的，光是心理上的满足就是无法用其他东西换来的，所以，你要加油，努力的做下去。

在HJ获得了很多心理上的满足感，所以在最不开心的日子，也会变得开心，当时也只是因为自己意外的和自己打了赌，看看自己能坚持听写多久～虽然目前还没结局，不过感觉已经收获到很多。所以，这次，也要和自己赌一次，看自己能有多大能力，做多少事～^^不过，建议自己调整下精力～合理安排时间，相信自己可以做到什么都不耽误滴～^^

每次面对一堆事情，都会忽然很兴奋，不过感觉最近行动力变差，所以，一定要善加利用自己的时间。

最后，说说今天的讲课。唉。。。很糟糕啦，离我的要求差很远啦。其实语速快只是个借口，我已经在控制了，而且经过VOA SP的练习，我觉得我正常情况下，语速可以降下来很多。今天的问题，衔接不到位，还会忘词。。。反正今天表现力不佳，本来应该会好的。睡觉你自己不练的，和你说了八百次了，就不听。过年就重新调整好PPT，可是什么时候才开始练的？上周。。。>_<笨还不主动。。。

PS：老爸成为完全的“家庭主妇”，今晚竟然给我做“银耳汤”说要把我养胖点。。。晕，偶已经够胖了～

        晚上坐车也挺幸运的，我走到路口看到503过来，自己背着本还穿高跟鞋，我觉得我赶不上了。所以就没跑，本来想放弃的，不过发现车停那好像有点久，所以猛跑～跑到那，看着车要开跑了，幸好站牌那又有人要上车，车又停下来啦，成功赶上～^^而且今天这个点竟然有座，幸福呀，至少不用站一个小时～所以，不要放弃，事情总有转机～如果我会看相，这个是不是个好预兆呢？

       胡言乱语完毕～明天一定要奋斗，很多很多很多机会，很多很多需要努力～

        最近狂迷巴赫，前一段是海菲兹版的无伴奏小提琴组曲。后来无意又回味了巴赫G大调无伴奏大提琴组曲中的前奏曲，我觉得这首可能是所有人都比较熟悉的一首，总觉得哪部电影的配乐用过，有点悲，又像大提琴在吟唱（每次听，就会联想到天鹅，夜幕～理论上不应该的，因为这首G大调的组曲应该是“青春”我联想出现问题？^^）。

        实在很喜欢大提琴的音色，比较沉稳，不知道是不是因为我太性急的关系，所以更喜欢听起来更为稳重的音色，弥补下我的性格。好像自己钟爱大提琴比小提琴多，相对而言，小提琴的音色还是比较高，没有大提琴那么浑厚，不过本来它体积也比较小。

       因为我家网络问题，有一段时间一直无法用电驴下载，实在等不了了，而且考虑到品质问题，所以最后还是买的CD。 是史塔克版的，巴赫的无伴奏大提琴组曲，整个专辑听完，最喜欢d小调无伴奏大提琴组曲中最后一首吉格舞曲，唉。。。可惜，最后一首跳盘～不知道怎么办，理论上可以找当当换滴，算了～从Youtube上找到一段马友友版的d小调无伴奏大提琴组曲--吉格舞曲。转过来～大家分享下～^^

介绍：第六号组曲“阳光”：以D大调写成，是阳光与凯旋的调性。这是所有调性中最喜悦的，就像触及环宇每个角落的贝多芬《合唱交响曲》的终乐章。巴赫的第六号组曲以胜利、喜悦、人类的统一、友谊与爱的调性写成，这个最后的组曲扬威于全系列之上。

看着视频，真的可以感受到阳光，不过最近天津的天气当然也分外的好啦～

（PS：时光过得好快呀，已经第二天，什么还没开始做～今天才把mail发出去，可是竟然头一次外国人的通讯地址全都不能用，最后无奈向一个中国老师咨询的，可我总觉得属于石沉大海型，不知道那个老师会不会看邮箱，期待会有收获～～）

找到另外一版Rostropovich，去看了介绍，才知道是杜普蕾的老师。我听到的第一首大提琴曲子就是杜普蕾拉的，也因为她的英年早逝，应该算是大提琴届一个比较有名的人物。Rostropovich版和马友友版确实有所不同～一起分享吧～（这个版本中包括d小调组曲中的最后两首，嘉禾舞曲和吉格舞曲～）

6：00 妈妈：“你还不起床” “恩，知道了” 挣扎着起床，一直鼓励自己，最后两天，也许是收获的季节，满心期盼着今天能出结果。

8：00 到学校，接种，收拾，赶车

9：00 本部  “你上次离过对吧，你也知道支原体这东西很恐怖，治不好，通过呼吸和皮肤传播，所以大家都很在意，上次让你去楼下做也是考虑这个。你尽量小心。你实验要怎么做？就离心是吧？”“^o^,这次有点改变。师兄，我要用下水浴锅。”“恩。。行，一会我给你开一个吧，我想想～”“恩。。师兄，我还得用下4度冰箱。”“用吧。”（～～好冷，不寒而栗，虽然早上坐车，确实很冷，这时，觉得更冷～）

“师兄，有枪吗？”“你们那没抢？”“^o^，不好意思，忘带了。”“你等等，我给你找一把，你一定要小心。”“嗯嗯，知道了，麻烦师兄了。”（人算不如天算，以为借把枪是很容易的事，结果原来这么难。结果，借我的枪，量程不准，就和用吧。）

11：00 “师兄，我要混悬一下，您这有混悬仪吗？”“能手摇就手摇吧。”“^o^。这个，光化学作用不行，还得需要点物理作用。不好意思师兄～。”“你去大屋看看吧～”“噢，谢谢师兄。那个，我一会还要用下水浴。我该用哪个水浴锅？”“你直接放孵箱吧，反正都是37度。”“恩。。这个，和水浴是一个效果吗？”“你不是就要孵育吗。”“恩，行，知道了，谢谢师兄。”

（真的很痛苦，到哪里，草木皆兵，就像我是个大病毒。抱着今天可以做出来的希望，坚守着～）

13：00 离心，文章没写多少度，疏忽呀，没查其他的。根据以前的资料，选择20度。室温下，应该Triton 是分层的。忐忑的等待20min后的结果。 结果，完全不如意。没有分层，只有沉淀和液体。（心里开始堵的晃，怎么办，继续做吗？真的不知道该要哪个，不要哪个？为什么怎么做结果都差不多呢？人家做的出来为什么我做不出来～还要再来这做，头疼。。。感觉自己像斗败的公鸡，叨叨个没完。还是硬着头皮楞做吧，也许第一次细胞没破，继续重复分相下）

14：40 第二次离心 （这次也许会好） 唉。。。依然，沉淀，上清。到底哪有脂相，我该怎么分，我观察不细？ （继续做第三次吧，明天把所有收集的东西，都测下蛋白）

16：00 按计划，最后离心，加乙醇，4度，过夜。配试剂。（第三次离心，已经完全死心，每次结果都一样。网友说不能用转角离心，其实我觉得不影响，要分层，怎么都会分的，垂直，转角应该差别不大。这时，已经不是斗败的公鸡了，被咬伤了，奄奄一息～愁，换了方法一样出不来，为什么，开始做了，发现什么都不懂，我觉得我连基本常识都没有。更愁的是，明天如果还能沉淀出东西，要超声助溶，愁死了，人家肯定不让用，又要看脸色。）

17：00 等868，反省，心里很堵的晃，早上凭着最后的希望爬起来，晚上带着所有的失望。路都走不动了。实在不行了，想想竟然在车上又哭了～真丢人，不过反正没人认识，放肆下吧～折腾了一道，回家不能放肆，要不老爸老妈又要问我了。

19：00 到家。老爸成了家庭主妇，不过这样至少回家我可以看到肉了。可是今天真的没胃口。老爸老妈看我辛苦，全力支持我，我在家什么都不用干，还有好吃的。可我这一周早出晚归，没有成果，又白费了，不知道我在干什么。

20：00 折腾了一天，头疼，可能是哭的，可能是其他，继续苦恼。不知道怎么办？时间越来越短，第一步就走不出去。infection and immunity的文章应该可以重复出来的，为什么不可以。从哪可以找到Triton 提蛋白一般原理的教材或文章呢？决定执行第一步，先给那个文章作者写信，最晚明天写完，顺利的话，人家假期这几天应该给我回复吧。唉，作者是巴斯德研究所的，自己法语没学好，要不用法语写，会不会人家回复快点。搜索了一下，竟然有3个邮箱，晕死，决定一块发。

下午忽然发现，我的另一半实验也不清楚。关于台盼蓝染色。如果把上清都吸走了，怎么区分死活，死细胞本来就漂起来了？正好在别人的实验室捡了一本Q & A，上面写的用胰酶处理细胞。回来看了看DXY的帖子，也这么说，那么我开始的设计应该没错。不过细胞总数好像是个问题，不会算了，不过好像乘乘除除，只要计数出来加减就行，因为是个百分数，不用算总数的。希望明天一颗树死了，还有一颗活着，要不我这一周都干什么了呢？

总之，今天很郁闷。实验没进展，更不知道怎么解决。文章没写，幻灯没做（其实幻灯不知道做什么，即使是老技术，其实学的也很多，近来也没发现什么流行的新技术，或者我不知道，总之懂得太少～）我可以有几天，我该怎么修正，未来该怎么安排，完全没想法。

对于去别人实验室无法适应的问题，反省再反省，我觉得是自己有问题，其实人家可能就是那样的，是我想多了，很羡慕以前认识的一个师兄，在别人的实验室如鱼得水。不过他做的事也很多了，帮很多人干活，也可以很敏锐的洞察一切，我就差很远。我真的是温室里的花朵吗？能适应未来吗？其实应该尽快适应别人的冷言冷语，这个总会面对，不可能所有人都对你是笑脸的～

今天最幸运的是，一路走来，坐车都很顺，平均等车时间不超过5min,老天唯一的眷顾吧～昨天偶尔听到的东风的生肖和星座评论。肖狗，近期5星，好好休息，开拓新一年。射手，上升，晴，难以说出的好，可能是精神的满足。都是良好势头，可我怎么感觉满天乌云呢？

看一个中科院一位研究员的文章，关于“科学游戏的规则”，引用一个老师对学生的评价，老师说：“一个好的学生永远不会失败（失败是指那些到博士毕业时还没有取得重要结果、不能拿到学位的人），因为他在做研究的过程中一直在不断观察，不断思考。他随时都在追踪自己的好奇心，在不断提出问题，在不断回答问题。而一个不开窍的学生是在为老师做试验，总是想拿到老师想要的结果”。

怀疑自己。。。

    虽然很晚，还是上来说几句。很累，不知道是我心态问题，还是其他，现在做实验的动力不足，感觉自己进入低潮期，天天跑上跑下，感觉快累死～晕晕的～

    本来状态就不好，今天竟然找不到东西。当场蒙掉，半胱氨酸盐酸盐没了。。。唉，这个配方里必须的，虽然用量不多，当时真的想罢工，眼看就2号了，很多地方也歇班了，说服了自己好半天，而且内分泌所那边也约好了，还是做下去吧，一拖会拖很久的。抱着试试看的心态打电话，结果对方还真的有，不过需要明天自己去拿。明天，来是来得及了，我后天才用这个培养基，不过跑来跑去，想想就累。幸好师妹很好，说帮我拿，明天还过来，真的很感谢～至少可以让我少去一个的地方，本来时间就不怎么够用。

    今天又让我体会到了计划不如变化，每次配培养基，计划都是2天的，上次因为血清迟迟不到，这次试剂又没了，汗。。。每次实验前，都希望自己可以未雨绸缪，每天想呀想，做前，一定给自己规定好，甚至规定到几点，不过总是有意外存在，头疼～可是计划还是要做，要不一点我更不知道做什么了，到实验室里全是事，可一天忙忙碌碌下来，却没什么成就感。

   今天配氯化镧，也很郁闷，虽然以前算了很久，但后来配完了，写总结的时候，却发现自己弄错了一个数量级，差了10的3次方。反正也没溶，最后重配的。一个DXY的战友建议我用PBS，第一次PBS配变混浊，我还以为是氯化镧的溶解度的问题，后来还高压了下，结果出现絮状，那时以为是我数量级错误，氯化镧可能溶不了那么多，后来又用新的量去配，发现加入PBS后，溶液立即成为絮状。严重怀疑PBS和氯化镧反应，第一反应用生理盐水重配（其实当时真的不想试了，爬上爬下，已经走不动了，不过如果今天不做，明天种细胞，后天就要用药，迫在眉睫，我不喜欢这么紧张），所以又去配。还好，溶解了。不过不知道用生理盐水溶药可以吗？因为多数文章里溶药确实用PBS，如果水溶性的会选择DMSO。不过反正N·S总比水强，先试试吧～明天打算再试试氯化镧可不可以高压，因为用滤器过滤太浪费了，我觉得盐类应该都可以高压的，反正有一段UV时间，可以试验～

     本来想今天带师妹处理一下胶塞，终于发现，相同实验，每个人遇到的问题不同。今天自己也学习了。上次我煮的时候，发现水后来变得有点绿，不过后来换酸煮，又正常了。今天师妹可能因为配液没注意，碱全部煮干，胶塞也全部报废，彻底了不用处理了。。。不过知道了，胶塞煮的时候一定不能煮干，而且电磁炉不同于电路，火力太大，记得一定要关小火。上次不知道为什么变绿，这次了解了，也算有收获，就是还要去别人那再拿这些东西。不过至少最近没处理的了，减少我年前的负担～^^

     配TBE，EDTA死也溶不了。上次人家溶的时候，你不参与讨论，这回傻了吧？回来去DXY查了下，发现DETA必须溶在强碱里，7.5～8。晕，原来这样。TBE，正好Tris也是PH8的，明天重配，应该没问题。查EDTA中无意发现的，终于知道文献最后为什么用比较弱的超声了，原来超声除了可以破碎细胞，还是助溶。不过很难查到功率呀，自己瞎试吧～头疼。。。

    明天要接种24孔板，紧张呀，完全没看别人做过，自己瞎参考中。不过我觉得我订的细胞浓度是对的，只是接种手法要小心，怎么能让他铺匀。网上关于是否要十字摇匀，众说不一，晕，分别information很困难滴。。。不行就只能试～

   OK，就这么多，累也要跑过来写，因为感觉今天还是学到挺多的。其实感觉这次这个方案蛋白应该可以提出来，当然是在不出意外的情况下，我不知道这次培养基会不会有问题，不是我配的，应该没有吧，我和师妹都是检验系的，这个都做过的～保佑～