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30 novembre Relax 忙里偷闲～要做的事情完成了一半，这两天一直想上来写，可不知道做什么去了，看表的时候发现已经半夜1点，不能再拖时间写这个，所以一直拖到今天～有些感情，可能已经拖掉了。。。^o^
算是忙里偷闲吧，本来不该的。不过有些事情，急忙完成了，有些事，早上4点半起来，做到8点半也算解决掉了，有些事情被延期了，所以从忙的四脚朝天中有所好转～不过，如果整理一下，事情依然在积累中……
周二的答辩，做的很糟糕呀～会答错问题，还是我准备不够，我想如果我有在前面一段较长的时间里，看过参考文献，不可能犯这样的错误，让人轻易看出破绽，一直认为即使“盗版”也要完美，而且，虽然具体不知道，但是整个过程我还是大概了解的～另外，也是准备不足，让我答辩时，声音都在颤抖，感觉以前好不容易练出的胆量，全都被吓回去了～李开复老师曾在书中写道：“他对自己承诺，不排练三次，决不上台演讲。 ”看书的时候，还要求自己以后一定要这么做，可以最后还是没有行动力，可能重视度不够，所以下次一定要改正。另外不能总批评自己了，最近在看书，关于优势，所以也鼓励下自己，偶觉得这次答辩我语速有所减慢。至少自我感觉是，下次应该听听其他人的反馈～ 相信可以改善。
很久前投的综述，22日的时候收到接受回执，当时很高兴，至少对我写的东西是个肯定。不过看到审稿意见后，那么高兴的心情降低了50%，妈呀，怎么那么多错～所以一直拖着没改（虽然当时确实有其他事，不过我相信如果我想做，我肯定早做好了，办事开始拖沓，这样不行，要改正）。拖延的后果就是导致我29号4点半起床赶工～唉，没事，自己折磨自己。
不过那天早起也是为给爸爸开门，理论上爸爸的火车4点50到塘沽。前一天晚上爸爸打电话回来，高高兴兴的说给我买了个无线鼠，我也知道爸爸是太疼我了，出门想到了，就给我买了，可我还是很郁闷的和爸爸吼了一通（唉，买的清华紫光的，怎么用？虽然没见到，可我知道自己肯定不满意）。可吼过就内疚了，都没问爸爸转天几点回来，也没和他说“路上小心～”。现在，爸爸出差，我都会很担心，所以让自己稍微忙些，没空想这些。那天晚上忽然想起来，爸爸出差前说他回来的时候，火车4点多到，他走回家，正好7点。妈妈呀，从火车站走回来～太远了，因为开车的关系，爸爸现在根本就不适应走路。因为前前后后的事，所以才决定29日要早起，我打算如果爸爸不打车回来，我就恐吓他，如果他5点30左右不到家，我就打车去接他～。所以那天早上很早起，给爸爸打电话，结果没恐吓成～^o^ 火车晚点了，到塘沽应该5点半多，那时已经有车了，而且爸爸也向我保证绝对不走回来。。。
关于鼠标，仍然耿耿于怀，不过也很无奈，我只能接受爸爸的礼物，按键很硬，滑轮就和，不过肯定达不到我换鼠标以求舒适的目的。本来爸爸回来，想忍着不说我的不满的，可是还是说了～我实在藏不住。可有时觉得自己折磨自己，说出来，爸爸肯定觉得挺难过的，我呢，因为自己的这个状态肯定会更难过。最后用着难用的鼠标，大家都不开心，何苦呢～好好接受人家的礼物不就好了？
虽然提前很久提醒自己要记得感恩节，可以还是忘了～忘了感谢很多要感恩的人。本来那天打算帮妈妈洗碗的，虽然只是一次，偶尔哄哄妈妈开心，也是挺好的。希望我的父母身体健康～也谢谢所有曾经帮助过我的人～
在HJ依然忙碌，不过很幸福可以有人修改我的翻译稿，让我从中学习。今天我值日慢速，因为标准空缺，所以一起翻译了。可能今天睡的最多，压力也相对小些，今天翻译的最好。老师夸奖了～^o^ 标准和慢速都做的挺好的～我希望自己可以一直保持这种状态～不过我的翻译水平实在很让我自己怀疑，有时翻的真是错误百出，基本上句句都会被修改，那种感觉很糟糕。
另外，今天重新学习了一个词"kill“上次老师是考过我的，可能那次我就翻译成"杀死了很多人",老师给我指正了，结果这次又翻译错了。真的不能错第三次了，我觉得如果再错，就是我态度的问题，学习不够认真。"kill“用在自然灾害为主语时，应该翻译成"夺去了很多人的生命”（一定记住呀～）
周三下午，忽然DNS错误，我这边整个网络崩溃，导致我什么都做不了。忽然发现，我离了网，好像翻译就不行了～所以要学习的很多，与其说我英语还好，不过说我现在真的很擅长用搜索引擎，现在基本上给我个主题，只要我想，都能搜到～最成功的例子，上次帮老师搜innoncense的歌词，一首法文歌，死活就找不到歌词，我一郁闷，就用法语的搜索引擎搜的，结果真的被我撞到～忽然找到的感觉真好，很有成就感～
OK，哗哗发泄了一通，下去了，还有很多事情要做，细胞长的不死不活，愁死我了～明天去看看～测测培养基的PH，问了别人，实在想不出其他问题，也可能是因为我以前消化倒掉太多，接种密度不够，所以它长的巨缓慢。我还是不大会镜下观察，需要练习～不知道练习后，我的会不会有这个潜能（关于看细胞的技巧）。。。
歌曲换成一首德文歌，Das Spiel游戏 ，我也听不懂歌词啦，只是很喜欢这种轻轻吟唱的感觉～ 25 novembre 用英语捐大米～ 【公益广告】用英语捐大米 新闻来源： HJ engllish 先看看这个题目：“选出display 的近义词：show，hear，make better，create。” 一个测试英语单词的网站，原因你绝对想不到——每答对一道题，就为贫困地区捐献十粒大米！因此网友转发网站链接的时候，都把题目改成了“用英语捐大米”。在免费大米（freerice）网站上，每次随机列出一个单词和它的四个近义词，让你从中选择一个正确的答案。答对后，页面右面出现一个画着10粒大米的盘子。这可不是游戏，免费大米网站是世界贫困网的姊妹网，大米最后都通过联合国粮食组织捐出。 网站提供单词给你练习英语，同时页面上也有美国快递和另一家公司的广告。网页广告费用来买大米。网站消息栏里写着“无论你是大公司的CEO还是穷国家街头流浪的孩子，提高英语词汇量都会改善你的生活。此时此刻，躲在世界某个角落里的饥民，可能正在享用你赞助的大米。” 答对一道题=十粒大米 那么十粒大米有多少呢？通过百度知道搜索了一下，发现有人提供了答案：“小时候做过实验，1克大米50粒，一公斤大米有50000粒。” 网站自从10月7日开始这个项目至今，已经捐出了635231060粒大米，差不多有12705公斤。Fearless倡议,大家赶快行动吧！英语不好的朋友也可以去碰碰运气，反正有25%的机会能捐十粒大米！用你的知识为饥饿的人们捐点大米！ 那么都是些什么英语单词呢？所有的词语分为50级，从初中生水平到教授们使用的专业词语。你在每个级别中答对数目超过三个，就会直接晋升到下一级别。据说自开站以来，还没有人水平超过48级。 来测试测试你的单词量吧~ :) Quatre Canacsa 四叶草（幸运草) (一直对四叶草有点着迷，今天看见了，所以贴下它的故事～^o^) 22 novembre 万里长征第一步～ 昨天从同学那拿来细胞。开始同学让我去拿的时候，没想过昨天就要传代，因为看文章说一般要稳定一天。不过，昨天同学说，如果我东西都准备好了，还是拿回去传代吧～因为没计划准备，所以思考了半天，骑车的时候也走神了，走错路了～^o^。后来，决定把超净台照1个小时，好给我时间思考，也准备点东西。
紧张了半天，最后还是传代了，因为自己定的目标是12月前把练习的细胞弄顺了，所以按时间来说，昨天传代还是合适的。
传代就问题多多了～对细胞的形态掌握不好，不知道什么是过，什么是不过。后来问师姐，师姐说：细胞周围变亮，翘起，估计就消化的差不多了。吹打的时候，因为上次泡沫阴影，又把培养基加少了，结果吹不起来，又加培养基，不但费了吸管，而且弄得泡泡满天飞，幸好是练习，要不我得心疼死。。。也不知道接种多少细胞，可以达到我的要求，明天（今天）可以长到我要的浓度，一个换液/传代；一个换液准备后天冻存。如果顺利的话，冻存的时候可以练习下计数，冻存好像不像传代，怕细胞又贴壁，忙得手忙脚乱的。我觉得，传代这个，我应该练很多次，减少气泡，掌握数量和时间。
保佑明天去看的时候细胞平平安安，至少没长菌，长的不好还是可以容仍的（由于我消化过了的话），至少它可以慢慢长起来，污染了，就功亏一篑了，还要麻烦人要细胞，而且也打击我的信心(这样东西本来我就很少)～～。昨天做的时候最后感觉犯了个错误，把细胞放孵箱后，因为太担心，又去看了它一眼，感觉培养基在瓶口乱晃，希望没有污染，液体到瓶口的时候通常很容易污染，虽然我很肯定我把瓶口烧了很多遍～ 吓担心也没用，明天就知道了～
有时想想，事情真是恐怖，我要这样一直坚持走下去，现在真的是万里长征的第一部，而且是最简单的一步。养细胞，至少操作小心，保持无菌观念，应该可以顺利。但是后面的MTT，PCR，Western想想。。。唉，条件、试剂、配置、结果，操心呀……不过马上就25岁了，也是该有越来越多操心的事的时候了，不能一直傻傻的活着～
我想要个架瓶子和移液管的架子，为了试验方便，就和我的“后勤部长”——老爸说了。老爸真是对我宠爱有佳，听姑妈说，爸爸那天什么都没做，开到老远的地方给我找有机玻璃，粘胶，下午又割又磨的，给我做好了。爸爸为了做的漂亮，折腾了半天（其实和爸爸说过的，拿铁丝做一个就好，可是爸爸说这么大个实验室，用个铁丝的多难看～）。真的很谢谢爸爸，每次让爸爸帮我做事，爸爸都是以我为第一，一定帮我做到最好。每次我给爸爸做事，总是耍小姐脾气，没有一次不发脾气的，虽然最后也做完了，但是可能真的让爸爸觉得很伤心。而且每次帮爸爸做事，爸爸都要求我好多次，我还真是很不乐意。我要说我忙，爸爸就会拖几天，再让我帮他做。我真的很自私～很内疚，下定决心再也不闹脾气了，不过今早打字，差点又不乐意了～ 我真是个坏孩子。。。
最近在魔法师那，很开心，大家对我的译文还算满意，有时能收到一两句表扬，至少给了我些许信心。不过这两天的文章翻译的不大好，老师给的分数也不高，我看我需要反省，应该是翻译的时候斟酌不够。
还有很多事情没做，时间总是不够用，如果我能少睡点觉就好了。
前两天坐车看了《永远的普罗旺斯》，虽然没看完，不过也大概了解，好像这本是作者随笔性质的，有点零散，没什么特别感觉，不过也许我选择的看书的地方不好，我想如果在图书馆，阳光照耀下，读这本书应该感觉很好，可以在想象中享受普罗旺斯的阳光和整片整片的薰衣草。另外，我觉得《普罗旺斯的一年》会好看。今天一心血来潮，正好当当在做活动，买书免邮费，所以又去搜书了，一买有多了，结果看上的书要花我72，可惜卡里只有70，买书计划流产。。。因为最近可能没机会去银行～希望我存上钱的时候，当当还在免邮费中。
今天送来了最后一本《新东方英语》，订了几年呢？不知道想不起来了，从新东方出杂志开始就在买吧。明年开始，不订了，所以今天纪念下～～ 16 novembre 等待结果。。。 今天分装了胰酶，向培养基中加入了血清。感觉做的不大好，没统筹好，事事遇到问题。
二氧化碳培养箱开气瓶竟然开错阀门了，幸好没拧开，爸爸说那个是打压阀，开了就爆了，应该是开上面的直角阀。都怪自己，上次不好好听爸爸说话，结果今天碰到问题，不过幸好，问题不大，最多折腾半个小时解决了。
Second， 生物安全柜，觉得blow了半天，仍然unsafe，给客服打了两个电话。后来等待中才发现安全柜上面写着鼓风要20分钟左右，确实大概20分钟以后，确实进入safe状态了。虽然说明书看了很多遍，但是真正操作还是记性不好。还有短期出去拿东西，还是不要关风机，要不再开又要等20分钟，很浪费时间。不过这个也好说，一次做过了，至少未来一段时间没有问题。因为滤网之类的有指示，所以那个到更换时，我应该可以知道。
然后就是胰酶和血清，没想到我在4度放了一夜，室温又放了一会，还是化的很慢。不知道分装的好不好？我近火烧的太多会不会影响胰酶的活力？还有一个疑问：培养基之类的东西，可不可以在紫外下照射？（DXY好像说的不可以，至少曾经见过；师姐告诉我可以；书上写的不可以，混乱～～）很想知道不可以的原因是什么？查找中。。。
这次高压也没经验，应该先问问别人的，饭盒里忘垫纱布之类的东西了，上层也是要铺一层，这样减少污染的概率。
今天最成功的就是调D-Hanks的颜色，感觉今天颜色高压后，正常些了。不过最新消息，内分泌所得D-Hanks根本没必要加酚红，因为酚红影响观察。只是在配胰酶的时候，才加酚红到D-Hanks里。另外，大家都说洗细胞的东西，酸了，碱了，影响不大，洗洗而已，不过我希望还是有个标准。D-Hanks高压前一般调到7左右。PH计应该没问题，以后水好了，估计配这个我可以很自信的做了。
现在的心情就像等待考试心情，忐忑不安，什么都做不了。因为今天配的培养基正在做无菌培养，希望它明天是无菌的。好害怕，一想起明天结果就很害怕。其实想想，也不知道哪里可以发生污染～ 瓶口都烧过，移液管之类也好好烧了，超净台用前酒精擦了，UV照了30分钟，然后用的时候又用酒精擦了，而且它自己本来就是净化级的。外面也用紫外线照过，地面用0.2%的新洁尔灭擦过。可是宿舍师姐说，细胞培养有时很奇怪，越小心，越出事故，什么都不在乎到没事。唉。。。担心呀。实验都是一环接一环的，希望明天没有污染。因为污染了，我都不知道哪有问题？ 大的培养基还可不可以信我都搞不清楚。而且理论上，明天细胞过来，如果污染了，那我用什么？God bless me。 有时真的想冲动的去庙里求求，当然这个不管了，所以想想就算了～
最痛苦的，不知道哪些操作时无菌的关键，怕把不该做的做了，该做的没做。继续学习吧～ 保佑明天是个好结果。。。
09 novembre 实验---Hanks （出师不利） 真的觉得自己是“事故大王”，奇才呀，配个Hanks也出问题。无语。。。
昨天晚上准备的时候，就发现网上有写Hanks高压后出现沉淀。我今天忙了一天，结果高压出来发现也有沉淀？不解～
因为内分泌所那边Hanks确实是用高压的？虽然免疫是用过滤的方法。
只是我对过滤还没信心，因为上次在内分泌所看他们过滤实在是非常小心。滤器现在我不知道怎么处理，问了问老师，老师说用洗涤剂刷刷就行。另外出口需要配一个胶皮管，真的不知道到哪找？问老师，老师说在西南角卖五金的地方，晕～不认识。决定明天在塘沽搜寻一下，爸爸说他对橡胶很了解，说了一通天花乱坠，搞得我更不知道买哪种了？问买仪器的，他没给我回复，等他送血清的时候，我得再问问，明天先去搜一下。另外，滤纸也得寄过来，估计最早要周三到。所以我现在不能用过滤的，只能高压。
今天事故的原因：
1. 在网上说： Hanks高压温度不能过高，10磅（115度）10分钟。我今天用的15磅（121度），20分钟。因为自动的只有这个选项，要用10磅得自己看锅，我怕我我放气放不好，瓶盖再飞了，不过无论怎样，结局今天还是失败了。（最不能接受的，怎么看上去这么简单的一件事还是出问题了？）
2. 书上说，一个试剂溶完，再溶另一个。可能是一开始的氯化钠，含量比较多，转子又比较小，没转匀，我也买看清，就加了后面的东西，结果加到中间，才发现。也没重做，不知道这个影响不影响。我觉得影响不大。（PS：到现在不理解，为什么一些盐类加法还有先后顺序，而且网上说法不一，有说需要按顺序，有说不需要的，我要再去查查）
3. 高压之后，我在85度的时候，就开锅盖了，不知道这个突然的温度变化，对试剂有没有影响？个人认为这个也不是主要原因。
4. 不知道转子的转速对配制试剂有没有影响？
我觉得可能和高压的温度太高引起的，去问问，然后记录在这里。
另外，还有说如果高压有沉淀，可以分别高压氯化钙溶液和剩下的混合液，然后无菌下混合。可是这样容积很不准呀？不理解怎么做的？
情绪：
其实被打击到了，不过不想让自己这么想。Hanks这东西，貌似真的没什么技术，怎么会这样呢？操作流程也会出现BUG？今天从11点一直忙到下午4点，结果竹篮打水一场空。我觉得跑步的时间太多了，这屋那屋的来回转，有点浪费时间。下次还要更好的做好计划，没想到今天洗瓶子洗了这么久，感觉还有一些细节不懂。周一要再问。另外，实在没办法了，请了个老师，只是老师很忙。期望她可以有空，有空来看着我做，这样我才知道哪错。进步才会快～
换个角度，就像小项说的，碰到问题，才是幸运，这样才知道怎么解决。所以，可能我是幸运，就是希望能快点解决。周一或周二再战吧。别因为失败就失望～
近期目标：做好培养，学会柔弦。
结果：
从坛子里回帖结果看，貌似Hanks确实不能高压。因为存在钙、镁离子。一个战友解释，和烧开水道理相似，水因含钙镁，所以加热会出现水垢。而且刚刚才知道，师姐他们配的D-Hanks，不是Hanks，D-Hanks 和 Hanks最大的区别就是没有钙、镁和葡萄糖。所以，这个理由似乎可以接受。
可是为什么司徒镇强老师的《细胞培养》中流程却写了Hanks可以高压呢，而且温度极高，356.18kPa，刚刚查了一下，100多kPa就是121度，那300多kPa得多少度呢？不解。。。怀疑书编写错误。
另外，网上有一个应该是某学校细胞培养实验教程，里面也说可以高压，只是温度在10磅。不死心，明天要试一次～（主要滤器出口还有问题，不能用，实在没辙，只好救急买一瓶了，周三或周四，细胞必然会过来。一拖再拖，总是开展不了，而且和同学说了好多次了～～～）
Appendix:据说加试剂的顺序确实没有影响，因为都是无机盐。。。
（明日待续结果。。。。明天肯定很忙。。。估计读完研我能瘦到90斤，不过也说不好，压力一大，吃多了，搞不好又成猪了～～～） 07 novembre 喘口气～ 思维混乱的忙碌了一上午～上来喘口气。
以前的日子，上课，下课，自己决定做什么，目标考好试，也就这么多，计划的事情好像很少。现在，时间基本都是自己的，实验开始完全要自己计划，还有一些别的事情，总感觉我脑子混乱，也总觉得自己会忘事情，经常把一件事写在好几个本上～晚上还和自己罗嗦很多遍，可总觉自己有时还是丢三落四，很担心自己。我觉得我的强迫症的症状貌似越来越严重。以前只是觉得门没关好，现在开始觉得电闸没关掉，有时也会真的烧水忘了拔电，因为粗心，所以对自己越来越没信心。相信自己还是很小心的～别这样了。
另外，总觉得现在自己不能在一段时间，认真做一件事情，总是做着这个，惦记那个，乱呀。。。一定记住，一次只做一件事情，谨防思维混乱，分清哪些重要，哪些要先做，有些事情肯定要先放弃一下，有时候，不能所有事都say yes。
今天订个试剂也折腾半天，幸好试剂的销售声音听起来很舒服，让我觉得不辛苦。终于试剂部分差不多解决了，剩下的就是细胞了。现在，真的要学会赖皮，天天去磨人，自己没做过，当然不能害怕，一定多问人，多说话好就好了，也不要太担心别人怎么看自己，sometimes, you need to trade off something～（I have just learned "trade off" from an article .）
我依然喜欢做很多计划，订下近期目标，这样可以有动力实现。虽然现在行动力不如前，也知道了“计划不如变化”，可没计划的时候，我过的像一盘散沙，浪费青春。。。
实验要计划，真的，要不你怎么知道每天做什么，现在设备上应该没问题了，看得就是你自己了，再有问题，就是人有问题，所以你自己要努力呀～ 相信认真、努力会有结果的，一直对我来说，不都是这样的吗？
虽然开始实验可能会忙，不过我觉得我应该还是有时间的，想了很久，不能让研究生白白过去，我一定要pass CATTI，即使我水平有限，考三笔应该没问题，只要抽时间复习就行。English never too much to learn.
实验期间一定要坚持看文章，这个时候，是你时间最自由也最愿意学习的时间，如果工作了，可能就事与愿违了，所以多看文章，至少1周看2～3篇。前一段一直疏于看文章，给人家改文章的时候，都不会改了，而且中文英文都要看，因为如果看的中文不够，写的时候感觉都写的不是中国话了。
貌似又有动力了，让自己忙的一塌糊涂，爸爸说，“现在不拼什么时候拼”，何况即使我完成了上面所有任务也不叫拼搏，只是完成了应该做的吧～给自己打打气，看到未来，才会努力前行～ 加油吧。。。
（PS： 其实很佩服钻婕MM，很多时候看了她的文章，觉得自己很不足，以前的时间，好像都被浪费掉了～） |
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